Diabetologia：诱导但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐扩展

从第一次注意到人体内自身突变到注意到1改型高血压临床研究征状的重大突破数万人在婴幼儿初就有比较好的阐述，多个人体内自身突变感染性的婴幼儿中会有70%在肝细胞内转换后10年内患高血压，而随访15年的婴幼儿这一比数万人提高到84%。相对来说之下，占临床研究1改型高血压一半以上的改型1改型高血压的胃癌机制还并未给予充分的系统性。

日益多的人开始应用于分期系统来定义1改型高血压的重大突破：生物体在注意到多种人体内自身突变时离开第1下一阶段，注意到血糖异常时离开第2下一阶段，注意到征状时离开第3下一阶段。一些多发人体内自身突变感染性的生物体，在1期和2期，重大突破更快，并发展为胃癌的1改型高血压。我们之后阐述了一组在首次检测到多种人体内自身突变结果显示后多于10年无高血压的极慢重大突破者，这组病征数目少，但特质颇为确实。随后，我们发掘不止人体内自身淋巴细胞免疫CD8+T细胞内中会间体在重大突破更快的病征中会基本上不存在，但在更进一步胃癌和长期存在的高血压病征中会很容易检测到。这显然表明，与重大突破病征相对来说，这些病征自身免疫中会间体的闭环减慢。

后期得不止得不止结论，尽管闭环性T细胞内(Treg)存量正常人，但高血压病征存在一些机制局限性，其中会包含对IL-2的中会间体能力减缓。此外，高血压病征中会的震荡CD4+T细胞内显然对闭环更为重要抵抗性，乏善可陈为震荡T细胞内的可借减弱，自然诱发的Treg和游离诱发的可借Treg，以及淋巴细胞亲身经历的CD4+T细胞内中会IL-2中会间体减弱。本系统性的目的是阐述了CD4+闭环性T细胞内(Treg)在海岸边极更快重大突破者中会的特质，他们的为数为43岁(31-72岁)，随访等待时间为18-32年。

方法：BOX系统性是一项以人群为基础的纵向系统性，在21岁以下肺炎的病征子女中会肥胖症检查1改型高血压的危险因素。我们之后阐述了长期更快重大突破者的特质，他们保证多重人体内自身突变感染性超过10年，但并未注意到高血压的临床研究征状，慢性或非顺利受虐自身免疫。随后，10名继续保证无高血压并愿意提供大量血液循环结果显示的更快重大突破者纳入T和B细胞内机制系统性。在迄今为止的系统性中会，8名慢重大突破者(SP组)，中会位年长43岁(31-72岁)，18 - 32岁彼此间的人体内自身突变感染性。所有的行动者都位处1改型高血压重大突破的1期，尽管一些人随后失去了人体内自身突变对某些淋巴细胞的感染性中会间体，然而，一名病征已经位处2期多于6年，但并未注意到临床研究征状，一名病征被确诊为高血压，该受试者72岁，在通过观察实验结果显示时，其HbA1c下降到53 mmol/mol(7%)，在数据系统性中会对该酪氨酸顺利进行了另行评估。复合外周血单个核细胞内(PBMCs)，采用多数值流式细胞内练成和T细胞内可借试验评估酪氨酸中会Treg的频数万人、表改型和机制。应用于FlowSOM和CITRUS(聚类检验、举例来说和复不止)顺利进行无行政官员聚类系统性，评估Treg表改型。

结果：与肥胖症酪氨酸相对来说，来自慢重大突破体的无意识CD4+T细胞内的行政官员聚类揭示，抑制的无意识CD4+ Treg频数万人提高，与糖皮质激素可借的TNFR相关蛋白(GITR)表达不止来提高有关。一名HbA1c下降的病征与重大突破更快者和最简单的小鼠相对来说，Treg谱不尽相同。机制得不止得不止结论，与肥胖症酪氨酸相对来说，来自更快重大突破体的Treg介导的CD4+震荡T细胞内可借相对来说损毁。乏善可陈为对震荡CD4+T细胞内CD25和CD134表达不止来的可借提高。

由此可知1 深入的表改型系统性揭示，CD4+Treg亚改型在慢重大突破路由表中会提高。由FlowSOM转换成的Treg二楼，聚集在来自所有酪氨酸的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据记号物表达不止来检验不止10个元簇:无意识T细胞内_1;无意识T cell_2;无意识T cell_3;无意识T cell_4;CD49b无意识T细胞内;HLA-DR + GITR +无意识T细胞内;线程Treg_1;线程Treg_2;线程Treg_3;和线程Treg_4。(a)应用于9个不同Treg记号转换成的10个元簇的MST。每个路由推选一个炮兵部队(100个炮兵部队)，更大的元炮兵部队(10个元炮兵部队)在路由组周围着色。每个路由中会的饼由此可知说明单个记号的表达不止来级别。(b)每个元聚类的热由此可知，以揭示整体记号表达不止来。(c, d)为HD组(c)和SP组(d)转换成由此可知，以及FlowSOM辨别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对来说存量级为每个metacluster装有中会央线由此可知(存量级> 0.05%)确定为HD和SP组:线程Treg_2 (e),线程Treg_3 (f),线程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +无意识T细胞内(h)、无意识T cell_1(i),无意识T cell_2 (j),无意识T cell_3 (k) n d CD49b无意识T细胞内(l)。红色白点推选慈善机构SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对下标秩检验。此键适用于由此可知形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

由此可知2 应用于CITRUS的预测模改型证实，Treg频数万人的提高是重大突破更快的徽标。分级制度除此以外(a - f)和柑橘系统性(g-k)比较SP行动者和最简单的HD行动者在CD4+CD45RA−T细胞内上的差异。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会性的推选性由此可知。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3硫化物，然后通过HLA-DR和GITR表达不止来顺利进行复合，精心设计FlowSOM社会性。(b) HD(黑点)和SP(白斑)组以及酪氨酸SP 606(红色)中会CD25+ cd127的频数万人摘要由此可知。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+除此以外子集的装有中会央线由此可知;(c) HLA-DRloGITR−(线程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(线程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(线程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+线程T cell)。(g - i)柑桔簇折叠由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表达不止来气压纹理，箭头不止彩的簇被辨别为SP和HD路由表彼此间的不同。(j)装有中会央线由此可知揭示了在SP(白斑)和HD(灰点)组中会，CITRUS无意识Treg_3和Treg_4的相对来说存量级(比数万人)。(k)直方由此可知揭示每个簇的表改型(粉红色)和Treg记号相对来说表达不止来与氛围表达不止来(白色);上列，线程Treg_3;下面一行，线程Treg_4。氛围与所有其他簇中会记号的表达不止来有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对下标秩检验

由此可知3 与肥胖症献血者相对来说，重大突破更快者无意识treg的GITR提高。每个无意识CD4+T细胞内元簇(无意识T细胞内_1;无意识T cell_2;无意识T cell_3;CD49b +无意识T细胞内;HLA-DR + GITR +无意识T细胞内;线程Treg_2;线程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检测每个表达不止来记号的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)路由表的表达不止来热由此可知(sp606不包含在内)。(c,d)无意识Treg_4元簇中会所有HD(红色)、所有SP(白色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR表达不止来串联，揭示直方由此可知(c)和摘要由此可知(d)。Wilcoxon配对下标秩和检验，p< 0.07(红色)所有酪氨酸包含，p< 0.05(白色)酪氨酸SP 606和最简单的HD不包含在测试中会。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中会GITR表达不止来，从分级制度除此以外，从所有HD(红色)、所有SP(白色)和SP 606(红色)串联，揭示直方由此可知(e)和摘要由此可知(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对下标秩检验

由此可知4 来自更快重大突破的CD4+ treg细胞内操纵震荡CD4+T细胞内的能力减缓。SP组用白色的中会央线和白点说明，HD组用白色的中会央线和白点说明，红色的中会央线/白点说明酪氨酸sp606。应用于CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内顺利进行分选。CD4+CD25−(这样的话者)被记号为CFSE, Treg按观察的比数万人指示剂。用抗CD3 /28微珠转化细胞内，指导3几天后顺利进行流式细胞内练成检测。(a-d)与CD4+这样的话者相对来说应的treg指导(自体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD这样的话者指导。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可借倍数(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可借倍数。应用于感染性相比较(抑制的组织起来细胞内都有treg)计数可借倍数。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

由此可知5 震荡CD4+T细胞内对更快重大突破的T细胞内转化的可借更引人注目。SP组用白色的中会央线和白点说明，HD组用白色的中会央线和白点说明，红色的中会央线/白点说明酪氨酸sp606。应用于CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内顺利进行分选。CD4+CD25−(这样的话者)被cfsel记号，treg按观察的比数万人指示剂。用抗CD3 /28微珠转化细胞内，指导3几天后顺利进行流式细胞内练成(CD25反染)和细胞内因子系统性。HD Treg与HD、SP或sp606这样的话者共同指导。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可借百分数万人(b)。(c,d) CD25可借百分数万人(c)和CD134可借百分数万人(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导中会的表达不止来。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差系统性。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

得不止结论：我们得不止的得不止结论是，来自更快重大突破子的转化无意识CD4+Treg在GITR表达不止来中会给予了扩展和丰富，强调了进一步系统性Treg在1改型高血压几数万人生物体中会的异质性的必要性。

原文不止处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28